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放大字体  缩小字体 发布日期:2024-02-28  来源:上海抚生实业有限公司
核心提示:   可用于elisa实验样本有血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆、细胞裂解液、尿液、唾液、脑脊液等。不同的样本类型有
   可用于elisa实验样本有血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆、细胞裂解液、尿液、唾液、脑脊液等。不同的样本类型有不同的处理方法。

3. 细胞培养上清:

含有细胞分泌蛋白和死细胞的细胞培养液。

将细胞培养上清液吸入离心管中并以 1000×g 离心 20 分钟,除去细胞碎片和杂质,收集上清液备用,样本保存在-20℃或-80℃,避免反复冻融。

4. 细胞裂解液:

经细胞裂解液裂解后的细胞溶液。

(1)吸出培养板中的培养基,用胰蛋白酶消化细胞,然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。 悬浮细胞可以省略该步骤。

(2)将细胞悬浮液收集到离心管中,以 1000×g 离心 10 分钟,然后吸去培养基,用预冷pbs 洗涤细胞 3 次。

(3)加入适量的预冷 pbs(建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。在 6 孔培养板中,每个孔 需要 150-250μl 的 pbs 来重悬细胞。

(4)使样本在-20℃或-80℃条件和室温条件下反复冻融,重复冻融过程数次,直至细胞全裂解。也可 以使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞。

(5)4℃下以 10,000×g 离心 10 分钟,去除细胞碎片,收集上清液, -20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

编辑:songjiajie2010

 
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