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放大字体  缩小字体 发布日期:2024-02-05  来源:北京方程生物科技有限公司
核心提示:  无菌操作基本技术1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以75% 乙醇擦拭无菌操作抬面,并开
  无菌操作基本技术

1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台以紫外灯照射 30-60 分钟灭菌,以 75% 乙醇擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风扇运转 10 分钟后,再开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同也不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以 75% 乙醇擦拭无菌操作台面。操作间隔应让无菌操作台运转 10 分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。

2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞。必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流流通。实验用品用75% 乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面之内无菌区域,勿在边缘非无菌区域操作。

3. 小心取用无菌实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约 45°取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。

4. 工作人员应注意自身安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染细胞株应特别小心操作,并选择适当等级的无菌操作台(至少class ii)。操作过程中,小心毒性药品,例如 dmso 及 tpa 等,并避免尖锐针头伤害等。

5. 定期检测下列项目:

5.1. co2 钢瓶中 co2 压力。

5.2. co2 培养箱:co2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。

5.3. 定期更换紫外线灯管及hepa 过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000 小时/hepa)。

6. 水槽可添加消毒剂(新洁尔灭 1:750),定期更换水槽的水。

编辑:songjiajie2010

 
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