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放大字体  缩小字体 发布日期:2024-01-24  来源:本生(天津)健康科技有限公司
核心提示: 细胞氧化应激的定量评价方法大致分做三类:1)测定由活性氧修饰的化合物;2)测定活性氧消除系统酶和抗氧化物质的量;3)测定含

 

细胞氧化应激的定量评价方法大致分做三类:

1)测定由活性氧修饰的化合物;

2)测定活性氧消除系统酶和抗氧化物质的量;

3)测定含有转录因子的氧化应激指示物。

进一步尚有:

1)生物体内氧化应激的程度足以产生应答;

2)活体内难以蓄积;

3)在活体内不是被代谢,而是稳定存在,等等。理解这些要点对于临床普及推广都很有用。

细胞增殖-毒性检测实验操作步骤

终止液是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。cck法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以bunsen的cck8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤

方法/步骤

1.在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% co2 的条件下)。

2.向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。

3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12,24或48小时)。

4.向每孔加入10μl cck8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响od值的读数)。

5. 将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

如果暂时不测定od值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl 0.1m hcl溶液或者1%wsds溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。


编辑:songjiajie2010

 
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