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放大字体  缩小字体 发布日期:2024-02-05  来源:上海联硕生物科技有限公司
核心提示: 原理: 琼脂糖凝胶电泳的分析原理与其他支持物电泳主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 琼脂糖
 原理: 

琼脂糖凝胶电泳的分析原理与其他支持物电泳主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 

琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大提高了分辨能力。但由于其孔径相比于蛋白质太大,对大多数蛋白质来说其分子筛效应微不足道,现广泛应用于核酸的研究中。

蛋白质和核酸会根据ph不同带有不同电荷,在电场中受力大小不同,因此跑的速度不同,根据这个原理可将其分开。电泳缓冲液的ph在6~9之间,离子强度0.02~0.05为适。常用1%的琼脂糖作为电泳支持物。琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的dna 片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低,但它制备容易,分离范围广。普通琼脂糖凝胶分离dna的范围为0.2-20kb,利用脉冲电泳,可分离高达107bp的dna 片段。 

dna分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。dna分子在高于等电点的ph溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链dna几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速率向正极方向移动。

编辑:songjiajie2010

 
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