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放大字体  缩小字体 发布日期:2024-04-10
核心提示: 厌氧手套箱(anaerobie glove box)即厌氧培养箱,是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱
 厌氧手套箱(anaerobie glove box)即厌氧培养箱,是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作,故名。

箱侧有一交换室,具有内外二门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(h2,co2,n2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中残余氧化合成水的原理。

该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落,这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均是自动调节。

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结构

共分为:厌氧室、传输舱、裸手袖套操作孔、气路及电路控制系统四大部分。

    1、厌氧室

内腔机械强制对流与内腔正压,实现恒温、控湿、除氧、生物脱毒四方面状态稳定均一,并且快速恢复,操作培养同室进行。

    2、传输舱

采用紧凑式筒状设计,实现单人单手轻松转移样品。

    3、裸手袖套操作孔

无需进行抽真空/充氮置换过程,双手可直进直出内腔厌氧。

    4、控制系统

全方位实时状态自检报警功能,确保设备正常运行。

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操作室厌氧环境形成

1.按使用要求放置好必要的配件和器具、并向操作室内放入两个无毒塑料袋。

2.混合气瓶、氮气瓶输入压力调整,调节减压阀,使输入压力为0.1mpa。

3.打开设备后配,电源开关后,按控制牌上的总电源键,使设备通电。

4.操作室放入1000g钯粒(密封),由冷凝系统除湿,并放入厌氧指示剂。

5.关紧取样室内外门,并抽真空校验(按控制面板上真空泵键,按一下开,再按一下关)。

6.操作室内第一次置换(氮气置换):

①先用橡皮管插入操作室内进气口,另一个插入塑料袋。

②接通氮气进气路,打开操作室氮气控制阀,使两只塑料袋充足氮气后,关闭电磁阀,然后扎紧袋口。

③把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧。

④把塑料袋内氮气渐渐的放于操作室内,至全部放除。

7.操作室第二次置换(氮气置换)重复一次冲氮过程,取样室先抽真空,并注意随时按排气阀关闭排气。

8.操作室第三次置换(混合气体置换) (混合气体配比为h2 1/85% h2 1/10% h21/10% co2/15%):

①调换气路打开操作室混合气阀进气,冲气时取样室先抽真空,并注意随时按排气阀关闭排气。

②混合气充满塑料袋后,关闭电磁阀,并打开混合气限流阀,使混合气经过稳流器、流量计、调整流量计,流量为每分钟10毫升左右。

③把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内。

④通过三次换气后,操作室内气体含氧量已处于极为量状态。

9.操作室内打开钯粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧,并在厌氧指示条反应区上滴一点洁净水,1-2小时后,观察其变色情况,反应部分深蓝色变为浅蓝为操作室内达到厌氧环境。

10.紫外线灭菌灯,室内进行灭菌处理,灭菌时间自定。

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菌种的置入和培养

1.检查取样室内门并关紧之。

2.打开取样室外门,将菌种放入取样室后即关上外门。

3.取样室充氮置换三次过程,先抽真空度500毫米汞柱(66kpa)以上停,然后打开取样室氧气阀进气,使指针回复零位,关掉阀。取样室充氮置换三次过程结束。

4.如选定真空度较低就需要增加置换的次数。

5.取样室外门开启、关紧后,再抽低真空度100毫米汞柱(13kpa)检验。

6.厌氧培养箱需要长期连续使用的条件:

①每天在操作室内放入美兰指示条观察,如不能正常就必须重新换气。

②要长期连续输入微量的混合气体。使补进的氮气能和微量的氮结合通过催化吸收,保证了室内厌氧状态,补入混合气流量选定为每分钟10毫升左右。

③连续培养运行一天,更换一次除氧剂和干燥剂。(换下的除氧剂和干燥剂可放在200℃干燥箱内,干燥2-3小时可使其复原)

7.接种棒灭菌器的应用:

①随时用镍烙电热丝使电极短路而变赤热以进行杀菌(接种棒)。

②熔蜡处可直接放上试管封蜡口旋转熔蜡。

8.操作室里的培养箱内的温度可任意选择和控制。

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注意事项

1.仪表尽可能地安装于空气清静,温度变化较小的地方。

2.开机前应全面熟悉和了解各组成配套仪器、仪表的说明书、掌握正确的使用方法。

3.培养物放入必须是在操作室内达到绝对厌氧环境后放入。

4.如发生故障(停气等原因)操作室内仍可保持12小时厌氧状态。(超过12小时则根据需要把培养物取出另作处理)

5.经常注意气路有无漏气现象。

6.调换气瓶时,注意要扎紧气管,避免流入含氧气体。

7.真空泵按要求使用,定期检查加油。

8.停止使用,关闭总电源键,及设备后部的电源开关。

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临床常见厌氧菌

 1、梭状芽胞杆菌属(clostridium)

简称梭菌属,常见致病菌有破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌和艰难梭菌,均为严格厌氧菌。其中产气荚膜梭菌常引起气性坏疽,且病程短、症状凶险;艰难梭菌常引起抗生素相关性腹泻,极易因误诊而产生严重症状。

2、卟啉单胞菌属(porphyromonas shah and collins)

常见致病菌有牙龈卟啉单胞菌、牙髓卟啉单胞菌等,严格厌氧菌。其中牙龈卟啉单胞菌是牙周疾病的主要病原菌;牙髓卟啉单胞菌主要引起牙髓及根尖组织疾病。

3、念珠菌属(candidiasis)

常见致病菌有白色念珠菌,厌氧菌。白色念珠菌口腔粘膜感染常引起口腔溃疡,而其在阴道内感染则是妇科疾病的主要起因。

4、乳酸杆菌属(lacticacid bacteria)

常见条件致病菌有嗜酸乳杆菌,厌氧菌。该菌为龋齿形成的主要原因,也是牙科主要防治菌之一。

5、螺杆菌属(helicobacter)

常见致病菌有幽门螺杆菌,微需氧菌。该菌为慢性胃炎和胃肠溃疡的主要病原菌,也与原发性胃癌有密切关系。

6.弯曲菌属(campylobacter)

常见致病菌有空肠弯曲菌,微需氧菌。该菌为肠炎的重要病原菌之一,常因抗生素治疗无效而延误病情,产生严重后果。

编辑:songjiajie2010

 
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