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放大字体  缩小字体 发布日期:2006-05-15
3m霉菌和酵母菌检验测试片操作以及判读
一、测试霉菌和酵母菌 操作方法  
1、未开封时,冷藏于≤8℃(≤46℉),并在保存期内用完,高温度时,凝固水可以排除,包装物最好于室温启开。 2、已开封的,将封口以胶带封紧。
3、保存再封的袋于≤25℃(≤77℉)和温度<50%,不要冷藏已开启的包装袋,并于一个月内使用完。 4、制备1:10和更大稀释的食物样品稀释液,称取或吸取食物样品,置入适宜的无菌容器内,如均质袋、稀释瓶、whirlpak bag或者其他灭菌容器内。
5、加入适量的无菌稀释液,包括buffered peptone buffer(idf phopsphate buffer ,用0.0425g/l的kh2po4调ph7.2) 、0.1%的旦白胶水(iso方法6887) 、缓冲旦白胶水(iso方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸馏水。不可使用含有枸橼酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液,因为它们能抑止菌生长。

6、搅拌或均质样品.

样品不需要调ph,但已调解ph的样品也能够使用。

7、将测试片置于平坦表面处,揭开上层膜。 8、使用吸管将1ml样液垂直滴加在测试片的中央处。
9、允许使上层膜直接落下,切勿向下滚动上层膜. 10、手拿压板横膜,将压板放置在上层膜中央处.
11、平稳的压下,使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上,切勿扭转压板。 12、拿起压板,静置至少1分钟以使培养基凝固。
13、测试片的透明面朝上,可堆叠至20片,于21-25℃(70-77℉)培养3-5天。
大的或快速生长的霉菌在培养5天后会呈现含混模糊的菌落,应在培养3天后记录高数量计数结果。
如果培养5天后,测试片上菌落丛生过快的生长,则以3天计数结果作为估计菌落数。培养时间和温度因方法而有不同,最通用的认可方法是:
aoac官方方法997.02
(食品类)
21-25℃培养5天。
14、可目视及用标准菌落计数器或其它的照明放大镜计数,并可参考判读卡计算菌落数。
二、测试霉菌和酵母菌 判读方法  
petrifilm and mold count moldtm测试片为预先制备好的培养基系统,它含有一种冷水可溶性的凝胶剂,营养基和一种指示染剂,可提供对比,利于菌落计数。
yeasr count=44
图1为酵母菌菌落特征:
  • 小型菌落
  • 菌落有明显的边缘
  • 菌落为灰白色到兰绿色,也可呈粉色
  • 菌落有隆起
  • 菌落颜色均匀一致,没有暗色中心
mold count=27
图2为酶菌菌落特征:
  • 小型菌落
  • 大型菌落
  • 菌落有扩散的边缘
  • 菌落有不同的颜色(以霉菌产生不同色素而定)如棕色.米色.橙色.和兰绿色等.
  • 菌落扁平
  • 通常菌落中心颜色深暗
years and mold count=0
图3所示在pym测试片上没有霉菌和酵母菌菌落.
yeast count=12
mold count=4
图4所示在pym测试片上有少数量的霉菌和酵母菌菌落.
estimated yeast count=480
mold count=21
圆形的生长区大约为30cm2,当菌落数超过150个为估计菌落数,可选择其中一个或几个有代表性菌落的小方格(1cm2 ),计算平均菌落数在乘以30,可得到整个测试片上的估计菌落数.
yeast count=tntc (实际菌数>104)
图6所示在pym测试片边缘框里光亮区的的小型.兰色菌落同样也分布在整个测试片中(尽管有较小的可见度),这是胶木菌菌落太多无法计数(tntc)现象.
mold count=59
图7所示,在测试片上霉菌菌落出现堆挤和彼此覆盖,为了方便计数,可将测试片分成几个区域,计算每个有明显暗色中心的菌落.所划的方形区内有15个霉菌菌落。
mold count=tntc
图8a和图8b为同一样品的测试结果.图8a为1:10样品稀释液,菌落小、虚弱暗淡、数量多、计数困难。图8b为1:100样品稀释液,生长菌落数在适宜范围(15-150个)内,很容易计数。
yesat and mold count=0 yesat and mold count=0
 
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