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放大字体  缩小字体 发布日期:2005-11-18  浏览次数:1474
  1.无标记对照dna1 此管内有20μl pbr328 dna100μg/ml,pbr328分别用bamhⅰ,bglⅰt hinfⅰ消化,它们的混合比例为2:3:3,共有16个pbr328片段,这些片段的大小分别为:4907,2176,1766,1230,1033,653,517,453,298,234,234,220和154×2bp。
  2.无标记对照dna2 此管内有20μl pbr328 dna200μg/ml,已用ecorⅰ线性化。
  3.dna稀释缓冲液 有两管,每管1ml[成分为:tris-hcl(10mmol/l),edta(1mmol/l),ph8.0(20℃)]内含鲑鱼精dna(50μg/ml)。
  4.标记对照dna 此管内有50μl线性化pbr328dna,按标记方法已标记有地高辛配基dutp,含20μg模板dna,每毫升含5μg合成的标记dna。
  5.六聚核苷酸混合物
  6.标记用混合底物 此管内有50μl 10倍浓度的dntp标记用混合底物,含datp(1mmol/l)dctp(1mmol/l),dgtp(1mmol/l),dttp(0.65mmol/l)和dig-dutp(0.35mmol/l),ph6.5(20℃)。
  7.dna聚合酶ⅰ大片段(标记级) 此管内有25μl dna聚合酶ⅰ大片段(klenow),2u/μl。
  8.(dig)ap结合物 此管内有200μl多克隆羊抗地高辛配基fab-片段,结合有碱性磷酸酶750u/ml。
  9.nbt 有两管,每管1.25ml,是溶于70%(v/v)二甲基甲酰胺的硝基蓝四唑盐溶液(75mg/ml)。
  10.x-磷酸盐 有两管,每管0.9ml,是溶于二甲基甲酰胺的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐的甲苯胺溶液(50mg/ml)。
  11.封阻试剂 有两瓶,每瓶有50g粉剂。
 
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