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放大字体  缩小字体 发布日期:2024-03-27
核心提示: ​​酶标仪的工作原理及结构01由酶联免疫吸附实验法可知,酶标仪应该用比色法来分析抗原或抗体的含量,即它应依
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酶标仪的工作原理及结构


01

由酶联免疫吸附实验法可知,酶标仪应该用比色法来分析抗原或抗体的含量,即它应依照比色原理进行工作。实际上,酶标仪就是一台变相的光电比色计或分光光度计其基本工作原理与主要结构和光电比色计几乎相同。图1是一种单通道、自动进样的酶标仪的工作原理图。

 

图1  一种酶标仪光路系统

 

光源灯发出的光线经过滤光片或单色器后,成为一束单色光束。该单色光束经过塑料微孔板中的待测标本,被标本吸收掉一部分后,到达光电检测器。光电检测器将投射到其上面的光信号的强弱变成电信号的大小。此电信号经前置放大、对数放大、模数转换等模拟信号处理后,送入微处理器进行数据处理和计算。最后由显示器和打印机将测试结果显示、打印出来。

 

微处理机还通过控制电路来控制x、y方向的机械驱动机构的运动。但对于非自动型的酶标仪,它是用手工来移动微孔板的,可以省去x、y方向的机械驱动机构及其电路,这样的仪器体积更小,结构也更简单。

 

微孔板是一种用来盛装待测样本的透明塑料板,板上有多排小孔,如有40孔板、55孔板和96孔板等多种规格。每个小孔可以盛放零点几毫升的溶液。根据仪器的不同,既可以一个孔一个孔地检测,也可以一排孔一排孔地检测。

 

酶标仪既可以使用和分光光度计相同的单色器,也可以使用干涉滤光片来获得单色光。和光电比色计一样,使用滤光片作过滤装置时,将滤光片设计到微孔板的前面和后面效果是一样的

 

光源灯发出的光,经过聚光镜、光阑后,到达反射镜,经反射镜作90°反射后,垂直通过比色液,然后再经滤光片到达光电管


一般酶标仪的光束既可以设计成从上到下通过比色液,也可以设计成从下到上通过比色。

 

酶标仪有单通道和多通道两种类型,单通道又分为自动型和手动型两种。其中,自动型的仪器设有x和y两个方向的驱动机构,在机械装置的驱动下,微孔板上的小孔一个个依次进入光束下面测试。手动型靠手移动微孔板来进行测量。

 

在单通道酶标仪的基础上,又发展了多通道、全自动型酶标仪。多通道酶标仪一般都是自动型的,它设有多个光束和多个光电检测器。如8通道的仪器,设有8条光束(或8个光源)、8个检测器和8个放大器。在机械驱动装置的作用下,样品被8个一排、8个一排检测。多通道酶标仪的检测速度快,但其结构比较复杂,价格也较贵,多用于大中型医院。

 

酶标仪的其他部分的结构,与光电比色计和小型生化分析仪基本相同。


区别


02

 

酶标仪和普通光电比色计的不同之处在于:


1)盛装比色液的容器不是使用比色皿,而是使用了塑料微孔板,塑料微孔板常用透明的聚乙烯材料制作,之所以采用塑料微孔板来作固相载体,是利用它对抗原或抗体有较强的吸附这一特点;


2)酶标仪的光束是垂直通过待测液的;


3)酶标仪通常不使用a而是使用光密度od来表示吸光度。


酶标仪和分光光度计的主要区别是什么呢?具体差别体现在以下三个方面:

 

1)盛装待测溶液的容器:分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液

 

酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液

 

2)光路的方向:分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。

 

垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。

 

3)光路的长度:由于光密度(od值)与吸光系数,待测组分的浓度以及光路长度正比关系

 

分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm,所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。

 

酶标仪采用的是垂直光路,所以光路的长度应该是液体液面的高度,所以测得的值受到样品的体积的影响

编辑:songjiajie2010

 
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